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疫苗生產(chǎn)用的細(xì)胞培養(yǎng)基——SFRE 199

更新時間:2018-11-20  |  點(diǎn)擊率:1431

目前,動物細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)已廣泛應(yīng)用于人用疫苗、獸用疫苗、基因治療藥物等生物制品的生產(chǎn)。理想目標(biāo)是實(shí)現(xiàn)細(xì)胞的高密度培養(yǎng)、高密度表達(dá),保證大規(guī)模生產(chǎn)的產(chǎn)品質(zhì)量。其中,用于細(xì)胞大規(guī)模培養(yǎng)的培養(yǎng)基是一大關(guān)鍵要素。

 

傳統(tǒng)疫苗生產(chǎn)多采用M199、DMEM、MEM等培養(yǎng)基加新生牛血清的方式,但由于血清成分的復(fù)雜性和不確定性,采用無血清細(xì)胞培養(yǎng)基已成為疫苗生產(chǎn)的發(fā)展趨勢。

 

SFRE 199是對M199培養(yǎng)基的改良型。和M199相比,SFRE 199顯著升高了8種氨基酸的濃度,包括精氨酸、半胱氨酸、胱氨酸、谷氨酰胺、谷氨酸、甘氨酸、組氨酸、酪氨酸,也升高了葡萄糖的濃度,使能獲得大的細(xì)胞生長而不表現(xiàn)出毒性。另外,加入了硫酸鋅、丙酮酸鈉和胰島素,降低了硝酸鐵、黃嘌呤和碳酸氫鈉的濃度,還添加了半乳糖,以避免乳酸過度積累,并使細(xì)胞在維持的延長期內(nèi),pH值保持在生理范圍。

 

SFRE 199分為2種:SFRE 199-1與SFRE 199-2。其不同在于,前者含有Hank's鹽。而后者為Earle's鹽。SFRE 199初用于Bak細(xì)胞(原代狒狒腎細(xì)胞)的生長和維持。國外有研究表明,SFRE 199不加胎牛血清即可用于培養(yǎng)Bak細(xì)胞,它與添加胎牛血清的常規(guī)培養(yǎng)基(M199、MEM)相比,細(xì)胞生長速率、產(chǎn)量和蛋白容量均相同,群體二倍分裂時間縮短,而生長的病毒滴度無明顯差別1,2。

 

 

Bak細(xì)胞超微結(jié)構(gòu)。未受病毒感染的Bak細(xì)胞用SFRE 199-1培養(yǎng)后,胞漿中出現(xiàn)更多糖原樣小顆粒(和傳統(tǒng)培養(yǎng)基相比)2

 

Vero細(xì)胞是世界衛(wèi)生組織和我國生物制品規(guī)程認(rèn)可的疫苗生產(chǎn)細(xì)胞系,常用于生產(chǎn)狂犬病疫苗、流感疫苗、脊髓灰質(zhì)炎疫苗、腸道病毒71疫苗等。Vero細(xì)胞無血清培養(yǎng)基的工藝開發(fā),已成為各國的熱點(diǎn)。國外有研究表明,SFRE 199-1可作為無血清培養(yǎng)基的基礎(chǔ)成分,用于Vero細(xì)胞的培養(yǎng)3,并在Vero細(xì)胞靜置培養(yǎng)中,以SFRE 199-1為基礎(chǔ)的無血清培養(yǎng)基可獲得細(xì)胞生長效果4。

 

 

總之,對傳統(tǒng)培養(yǎng)基進(jìn)行改良以獲得更高的細(xì)胞活力和密度、獲得更快的病毒增殖速度和更高的病毒滴度,已成為各個藥廠不斷努力的目標(biāo)。細(xì)胞培養(yǎng)基的高品質(zhì)和個性化,對目標(biāo)的實(shí)現(xiàn)尤為重要。北京締一生物作為的細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)商HiMedia的國內(nèi)總代理,愿與各個藥廠竭誠展開合作,提供的產(chǎn)品,為中國的生命科學(xué)助力加油!

 

注釋:

 

1. 吳長安. 無血清化學(xué)限定培養(yǎng)基對原代細(xì)胞的培養(yǎng)及其對病毒的敏感性. 國外醫(yī)學(xué).生物制品分冊. 1981, 4:190-191

 

2. S.A.Weiss, et al. Chemically defined serum-free media for the c*tion of primary cells and their susceptibility to viruses. In Vitro.1980,16(7):616-628

 

3. Jack Litwin. The growth of Vero cells in suspension as cell-aggregates in serum-free media. Cytotecnology 10:169-174,1992

 

4. Jack Litwin. The growth of Vero cells as suspended aggregates in serum-free medium.Animal Cell Technology, 1992: 414-417

 

HiMedia簡介:

1975年成立,的生物科學(xué)公司。近50年一直致力于細(xì)胞培養(yǎng)基和微生物培養(yǎng)基的研發(fā)和生產(chǎn),是通過WHO GMP認(rèn)證的培養(yǎng)基生產(chǎn)廠家,并具有ISO9001,ISO13485:2003認(rèn)證,CE認(rèn)證和FDA注冊登記。HiMedia公司具有先進(jìn)的生產(chǎn)工藝和嚴(yán)格的質(zhì)量管理體系,為制藥、疫苗生產(chǎn)、食品工業(yè)、實(shí)驗(yàn)室科研等領(lǐng)域,提供高質(zhì)量的產(chǎn)品。其產(chǎn)品已行銷140多個國家。

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