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檢測(cè)水中單增李斯特氏菌的HiMedia顯色培養(yǎng)基

更新時(shí)間:2019-10-21  |  點(diǎn)擊率:1109

現(xiàn)在,市面上能見(jiàn)到的顯色培養(yǎng)基大多用于食品和臨床,但HiMedia廠家生產(chǎn)的顯色培養(yǎng)基覆蓋面廣,能用于供水行業(yè)和環(huán)境監(jiān)測(cè)站。下面為您介紹一下。

 

顯色培養(yǎng)基的評(píng)價(jià)常有多個(gè)指標(biāo),如靈敏度,特異性等,它們也與所檢測(cè)的樣本類型有關(guān)。生產(chǎn)廠家經(jīng)常不提供這些指標(biāo)。但一些第三方檢測(cè)中心或研究機(jī)構(gòu)對(duì)此則有相關(guān)研究,并發(fā)表在專業(yè)期刊上。

 

2011年,《學(xué)術(shù)研究期刊》發(fā)表了一篇對(duì)顯色培養(yǎng)基的比較研究。作者來(lái)自埃及國(guó)家研究中心水污染研究部,他們通過(guò)用顯色培養(yǎng)基檢測(cè)了水中的單核細(xì)胞增生李斯特氏菌,對(duì)顯色培養(yǎng)基進(jìn)行了評(píng)價(jià)(見(jiàn)參考文獻(xiàn)1)。

 

作者指出,單核細(xì)胞增生李斯特菌是廣泛存在的食品致病菌,致死率較高(>20%)。它從家禽、鱒魚(yú)、壁虱、甲殼類,水、污水、植被、食品中已能被分離出來(lái)。對(duì)于人類而言,食品和水是常見(jiàn)的致病源。

 

傳統(tǒng)的培養(yǎng)法分離李斯特菌屬費(fèi)力耗時(shí),需要增菌乃至預(yù)增菌使水中低豐度的單增李斯特菌得到恢復(fù)。顯色培養(yǎng)基的出現(xiàn)可改善這一檢測(cè)方法。

 

研究者收集了尼羅河地表水的60個(gè)水樣本。收集水平遵照了200年APHA發(fā)布的指南。所有水樣均收集在無(wú)菌的1L玻璃瓶中(Simax品牌,捷克共和國(guó)產(chǎn)),并在4℃條件下運(yùn)輸?shù)綄?shí)驗(yàn)室。所有樣品在收集后6小時(shí)內(nèi)進(jìn)行細(xì)菌學(xué)檢查。

 

研究用的單增李斯特氏菌標(biāo)準(zhǔn)菌株編號(hào)為NCTC 10890。研究者采用了HiMedia公司生產(chǎn)的HiCrome Listeria Agar Base(以下簡(jiǎn)稱HLA)。這款顯色培養(yǎng)基基于李斯特菌*的β葡萄糖苷酶與鼠李糖發(fā)酵。β葡萄糖苷酶裂解顯色底物,使得李斯特菌屬菌落呈現(xiàn)藍(lán)色,而其他菌屬為白色。李斯特菌的內(nèi)部鑒別是基于鼠李糖發(fā)酵。單核細(xì)胞增生李斯特菌為藍(lán)綠色菌落。研究者還采用了另一個(gè)公司生產(chǎn)的BBL CHROMagar顯色培養(yǎng)基(以下簡(jiǎn)稱BBL)。

 

研究遵循了2005年APHA指南,采用薄膜過(guò)濾法對(duì)單核細(xì)胞增生李斯特氏菌進(jìn)行了檢測(cè)和計(jì)數(shù)。濾膜放置在培養(yǎng)基上,37℃倒置孵育24小時(shí)。對(duì)典型菌落計(jì)數(shù),單位為CFU/100 ml。菌落的進(jìn)一步確證采用PCR法。終計(jì)算得出靈敏度(真陽(yáng)性率)、特異性(真陰性率)、總有效率(即(真陽(yáng)性+真陰性)×100/總數(shù)),并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析(t檢驗(yàn))。

 

結(jié)果見(jiàn)表1、表2、表3和表4。

 

表1. 在不同培養(yǎng)基上,單增李斯特氏菌標(biāo)準(zhǔn)菌株的菌落特征

菌株

培養(yǎng)基

陽(yáng)性菌落

正確數(shù) (%)

假陰性菌落

假陰性數(shù)(%)

單核細(xì)胞增生李斯特氏菌

HLA

藍(lán)綠色

31 (96.9)

白色

1(3.1)

BBL

藍(lán)綠色

30 (93.8)

藍(lán)色至藍(lán)綠色

2(6.2)

 

表2. 非單增李斯特菌菌株在不同培養(yǎng)基上的菌落情況

菌株

培養(yǎng)基

真陰性結(jié)果 (%)

假陽(yáng)性結(jié)果(%)

E. coli O157:H7

HLA

10 (100)

0(0.0)

BBL

9 (90.0)

1(10.0)

 

表3. 培養(yǎng)基分離標(biāo)準(zhǔn)菌株的有效性

 

HLA

BBL

PCR

真陽(yáng)

31

30

31

真陰

10

9

9

假陽(yáng)

0

1

1

假陰

1

2

1

靈敏度

96.8%

93.7%

96.8%

特異度

100%

90%

90%

有效率

97.6%

92.8%

95.2%

 

表4. 60個(gè)尼羅河水樣在不同培養(yǎng)基上單增李斯特菌的假陽(yáng)性率

 

分離株數(shù)量

假陽(yáng)性數(shù)(%)

HLA

40

2(5.0)

BBL

40

5(12.5)

 

由上表可見(jiàn),HiMedia的李斯特菌顯色培養(yǎng)基(HiCrome Listeria Agar Base)靈敏度為96.8%,特異度為100%,并已被PCR進(jìn)一步確證,令人滿意,且好于另外一種品牌的顯色培養(yǎng)基。作者認(rèn)為,HiMedia的李斯特菌顯色培養(yǎng)基不失為一種靈敏、快速、特異的方法,并且無(wú)須任何確證試驗(yàn)。

 

HiMedia公司是微生物產(chǎn)品生產(chǎn)商,具有40多年生產(chǎn)研發(fā)經(jīng)驗(yàn),具有WHO-GMP認(rèn)證、ISO9001,ISO13485質(zhì)量體系認(rèn)證和CE、FDA注冊(cè)登記。產(chǎn)品已行銷世界上140多個(gè)國(guó)家。

 

締一生物作為HiMedia公司在中國(guó)的代理商,在微生物培養(yǎng)和檢測(cè)領(lǐng)域,一如既往地為您帶來(lái)的服務(wù)。

 

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