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李斯特菌顯色培養(yǎng)基的操作步驟和質(zhì)量控制

更新時間:2019-04-15  |  點擊率:1754
     李斯特菌顯色培養(yǎng)基的操作步驟和質(zhì)量控制
  李斯特菌顯色培養(yǎng)基通常是采用屬特異性β-葡萄糖苷酶和磷脂酰肌醇或膽堿酶顯色技術(shù)。平板制備時對磷脂酰肌醇或膽堿配套試劑要求嚴(yán)格,溫度過高會產(chǎn)生絮狀物,難以觀察到菌落特征,溫度過低又易凝固而不能再次加熱溶解。
  李斯特菌顯色培養(yǎng)基的注意
  此培養(yǎng)基僅供實驗室使用。
  李斯特菌顯色培養(yǎng)基的用法
  稱取基礎(chǔ)培養(yǎng)基14.2g加入180ml蒸餾水,加熱溶解并不停攪拌;另取1.2g李斯特氏菌添加劑,加入20ml無菌水,并加入一些玻璃球,不停振動1-2min,使其混合均勻,將二者分別于121℃高壓滅菌15min。冷至50℃左右時,把李斯特氏菌添加劑加入基礎(chǔ)培養(yǎng)基中,并加入李斯特氏菌抑菌劑1和2各1支,混勻,傾入無菌平皿。使培養(yǎng)基的厚度約為5mm,這樣有利觀察不透明環(huán)。
  貯存
  制備好的固體平板保存于2-8℃,應(yīng)避免光線直接照射。干燥培養(yǎng)基應(yīng)放置于陰暗干燥處,保存溫度2-8℃
  失效
  干燥培養(yǎng)基超過保質(zhì)期、結(jié)塊和顏色變化都不能使用。
  李斯特菌顯色培養(yǎng)基的操作步驟
  使用前,把制備好的培養(yǎng)基放置室溫10-20分鐘。
  1、按SN標(biāo)準(zhǔn)、GB標(biāo)準(zhǔn)、FDA標(biāo)準(zhǔn)、ISO標(biāo)準(zhǔn)或其它標(biāo)準(zhǔn)制備樣品液;
  2、把25g樣品液加入225mlEB增菌液中30℃培養(yǎng)48小時;或把樣品液和Half-Fraser增菌液按照1:10的比例混勻,30℃培養(yǎng)24小時。
  3、取一環(huán)增菌液劃線接種到李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基上,37℃培養(yǎng)24-48小時。
  李斯特菌顯色培養(yǎng)基的質(zhì)量控制
  1、外觀
  此干燥培養(yǎng)基的粉末均勻,具有良好的流動性,呈淡黃色。制備好的平板呈不透明乳白色培養(yǎng)基。
  2、微生物試驗
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